Серологическая диагностика боррелиоза

Серологическая диагностика боррелиоза

ЭТИОЛОГИЯ И ПАТОГЕНЕЗ наверх

1. Этиологический фактор: грамотрицательные спирохеты рода Borrelia переносимые клещами; в Европе чаще B. garinii , B. afzelii , реже B. burgdorferi . Спирохеты после попадания в кожу распространяются в окружающие ткани и вызывают раннее кожное изменение (мигрирующая эритема); в течение нескольких дней или недель с кровью и лимфой распространяются во многие органы.

2. Резервуар и пути передачи: дикие животные; инфицирование в результате присасывания зараженного клеща. Не подтверждена возможность заражения при гемотрансфузии или сексуальном контакте.

3. Эпидемиология : в основном северо-восточные регионы США, Центральная Европа, Скандинавия и эндемичные районы в России; в Российской Федерации эта инфекция имеет широкое распространение — от Балтийского побережья до берегов Тихого океана. Факторы риска: пребывание в очагах обитания клещей на эндемичных территориях, длительный контакт клеща с кожей (>48 ч), раздражение клеща (напр. выдавливание, смазывание бензином или жиром, прижигание и т. д.).

4. Инкубационный период и контагиозность: кольцевидная эритема появляется как правило через 3–30 дней после присасывания клеща, но инкубационный период может длиться до 3 мес. Инфекция не передается от человека к человеку.

КЛИНИЧЕСКАЯ картина И ЕСТЕСТВЕННОЕ ТЕЧЕНИЕ наверх

Стадии заболевания (могут накладываться либо возникать одновременно, как правило, все симптомы не проявляются):

1. Ранняя ограниченная стадия:

1) гриппоподобные симптомы;

2) мигрирующая эритема — появляется обычно после ≈7 (3–30) дней от присасывания клеща; первоначально красноватое пятнышко или папула, быстро увеличивается по направлению к периферии, диаметр >5 см, кольцевидной формы с просветлением в центре (может быть равномерно окрашена), края четко отграничены (рис. 18.6-1), остается в плоскости кожи, безболезненная и не зудящая;

3) редко лимфоцитома кожи — безболезненный, красно-синеватый узелок, чаще на ушной раковине, сосках или мошонке. У больных, не леченных антибиотиками, мигрирующая эритема и системные симптомы проходят в течение 4–12 недель; у некоторых слабо выраженные симптомы сохраняются в течение нескольких лет или развиваются хронические симптомы поздней стадии (могут быть первым и единственным симптомом боррелиоза даже спустя несколько лет после заражения, напр. артрит).

2. Ранняя диссеминированная стадия (органная) — может развиться от нескольких недель до нескольких месяцев от присасывания:

1) артрит — чаще один, иногда несколько крупных суставов (коленный, голеностопный, локтевой), как правило, без выраженной системной воспалительной реакции, несмотря на обычно обильный выпот в суставной сумке, рецидивирующие обострения (от нескольких дней до нескольких недель) со временем становятся все реже, короче и менее тяжелые, нелеченные могут переходить в хроническое воспаление;

2) миокардит (≈5 % больных) — внезапная предсердно-желудочковая блокада или другие нарушения проводимости и ритма, как правило, сосуществуют суставные и неврологические симптомы;

3) поражение нервной системы ( нейроборрелиоз ) — одновременное или постепенное вовлечение центральной и периферической нервной системы на разных уровнях: лимфоцитарный менингит (как правило, легкий; единственным симптомом может быть головная боль) и воспаление черепных нервов (паралич или парез, чаще лицевого нерва, может быть двухсторонним).

3. Поздняя стадия:

1) хронический атрофический акродерматит — красно-синюшные, обычно, несимметричные изменения кожи дистальных отделов конечностей, появляющиеся через несколько лет после заражения; первоначально воспалительный отек, затем преобладает атрофия (тонкая кожа с фиолетовым оттенком, лишенная волос), часто болезненность близлежащих суставов и парестезии;

2) хронический артрит , редко постоянное повреждение; легкий миозит, бурсит или тендинит ;

3) хронический нейроборрелиоз (очень редко) — воспаление нервных корешков и периферических нервов, периферическая полинейропатия, хронический энцефалит и миелит.

Серологическая диагностика, двухэтапная:

1) специфические IgM в сыворотке (метод ELISA);

2) в случае положительного или сомнительного результата — подтверждение методом вестерн-блоттинга.

Положительный результат серологического исследования без клинических симптомов, типичных для Лайм-боррелиоза, не имеет диагностического значения. Специфические IgM появляются в крови через 3–4 недели от заражения (пик 6–8 нед.) и исчезают в течение 4–6 мес. Специфические IgG обнаруживаемые через 6–8 недель от инфицирования, сохраняются в течение многих лет даже у пациентов, успешно пролеченных антибиотиками. Иногда это также касается специфических IgM. При удерживающимся положительном результате определения антител IgM без появления антител IgG через 2 мес. от инфицирования — результат вероятнее всего ложноположительный, особенно у лиц без типичных клинических симптомов.

При нейроборрелиозе специфические IgM или IgG присутствуют в СМЖ. Как на ранней, так и на поздней стадии можно определить лимфоцитарный плеоцитоз, но при воспалении черепных нервов на ранней и поздней стадии нейроборрелиоза охватывающего периферическую нервную систему СМЖ обычно в норме.

Поздние стадии заболевания можно диагностировать, если клинические симптомы сохраняются ≥12 месяцев.

1. Антибиотикотерапия: выбор антибиотика и длительность его приема зависит от формы заболевания →табл. 18.6-1. Не показано применять антибиотикотерапию, если нет клинических симптомов, даже если обнаружено наличие специфических антител. Длительная многомесячная антибактериальная терапия не приносит ожидаемого клинического результата и не улучшает качество жизни пациентов.

Читайте также:  Сколько дней болит место после удаления зуба

2. Иногда происходят рецидивы симптомов, которые требуют повторной антибиотикотерапии. Их следует дифференцировать от сохраняющихся и постепенно регрессирующих симптомов в течение нескольких недель после окончания лечения (требуют только симптоматического лечения).

3. На поздней стадии нейроборрелиоза и хронического воспаления суставов симптомы могут не исчезать, несмотря на лечение → показано применять симптоматическое лечение, исключите другие причины симптомов.

При необходимости — напр. НПВП, пункция сустава для декомпрессии.

Соответствующая антибиотикотерапия на ранней стадии заболевания обеспечивает выздоровление в >90 % случаев. У оставшихся больных могут проявиться поздние симптомы со стороны нервной системы, суставов и кожи.

1. Вакцинация: не существует.

2. Постэкспозиционная профилактика: однократно п/о 200 мг доксициклина исключительно в случае множественных случаев присасывания клещей у взрослого человека, находящегося в эндемичной зоне боррелиоза, проживающего постоянно за пределами этой зоны. Эффективность такой тактики у детей еще не подтверждена.

1. Защита кожи во время пребывания на лесных и луговых территориях — длинные рукава, длинные штаны, длинные носки, натянутые на штанины, шапка с козырьком или шляпа, одежда светлого цвета (легче заметить клещей), обувь с высоким голенищем.

2. Репелленты (средства, отпугивающие клещей, лучше содержащие ДЭТА, распылять на одежду и открытые участки кожи, за исключением лица) или перметрин (убивает клещей при контакте, сбрызгивать только одежду).

3. Тщательный контроль кожных покровов после каждого возвращения с лесных и луговых территорий (в частности пах, подмышки, за ушными раковинами, складки кожи).

4. Немедленное механическое удаление клеща — узким пинцетом взять клеща как можно ближе к коже и вытягивать его вдоль оси присасывания (рис. 18.6-2). Если в коже останется головная часть клеща (не увеличивает риска заражения) — только дезинфекция. Не следует выкручивать клеща, прижигать, смазывать жирными веществами, алкоголем или бензином, так как это увеличивает количество рвотных масс и слюны клеща, выделяемых в кровь, и повышает риск заражения. Следует промыть рану дезинфицирующим средством, руки вымыть водой с мылом. После удаления клеща необходимо проинформировать пациента о симптомах заболевания и порекомендовать наблюдение за местом присасывания в течение 30 дней, ожидая появления мигрирующей эритемы.

5. Защита домашних животных (собаки, кошки), которые могут принести клещей в квартиру — репелленты для животных, контроль кожи животного и механическое удаление клещей.

6. Обязанность сообщения в органы исполнительной власти региона в сфере здравоохранения и управления Роспотребнадзора по субъекту Федерации : да.

Исследуемый биоматериал Кровь венозная (сыворотка)
Метод исследования Иммуночип
Cрок исполнения с момента поступления биоматериала в лабораторию 8 к.д.

Лайм-боррелиоз, болезнь Лайма или иксодовый клещевой боррелиоз – природно-очаговое, полисистемное инфекционное заболевание, вызываемое спирохетами рода Borrelia. Клинически проявляется поражением опорно-двигательного аппарата, нервной и сердечно-сосудистой систем, кожи. Группу иксодовых клещевых боррелиозов составляют заболевания, вызываемые чаще всего B.burgdorferi, B.garinii и B.afzelii. При попадании боррелий в организм возникает клещевая мигрирующая эритема. Однако почти в половине случаев эритема не проявляется в начале заболевания — безэритемная форма. Применение современных методов серологической диагностики дает возможность своевременно обнаружить боррелиоз на начальной стадии и заметно снизить риск развития тяжелых хронических форм болезни Лайма.

Не менее 3 часов после последнего приема пищи. Можно пить воду без газа.

Результаты лабораторных исследований не являются единственным критерием, учитываемым лечащим врачом при постановке диагноза и назначении соответствующего лечения, и должны рассматриваться в комплексе с данными анамнеза и результатами других возможных обследований, включая инструментальные методы диагностики.
В медицинской компании «LabQuest» Вы можете получить персональную консультацию врача службы «Doctor Q» по результатам исследований во время приема или по телефону.

На этой странице находиться только текст статьи. Полная статья с картинками и таблицами находится здесь
Для просмотра требуется программа Adobe Reader.

Проблемы серологической диагностики иксодового клещевого боррелиоза у детей

Е.А. Мурина, д.б.н., в.н.с., руководитель отдела вирусологии и молекулярно­биологических методов исследования ФГБУ ДНКЦИБ ФМБА России,
г. Санкт­Петербург
О.В. Голева, к.б.н., с.н.с. отдела вирусологии и молекулярно­биологических методов исследования ФГБУ ДНКЦИБ ФМБА России, г. Санкт­Петербург
З.А. Осипова, к.б.н., н.с. отдела вирусологии и молекулярно­биологических методов исследования ФГБУ ДНКЦИБ ФМБА России, г. Санкт­Петербург
А.Л. Мукомолова, к.м.н., н.с. отдела вирусологии и молекулярно­биологических методов исследования ФГБУ ДНКЦИБ ФМБА России, г. Санкт­Петербург

В статье представлены проблемы серологической диагностики иксодового клещевого боррелиоза. Показана роль лабораторных серологических исследований в постановке диагноза. Приводятся данные по основным методам обнаружения и идентификации вирусов, вызывающих клещевой боррелиоз. Рассматриваются интерпретации полученных серологических исследований.
Ключевые слова: клещевой боррелиоз, серологическая диагностика, дети, лабораторный диагноз, интерпретация результата.

The Problems of Serologicl Diagnostics of Tick­Borne Borreliosis in Children
Е.А. Murina, O.V. Goleva, Z.A. Osipova, A.L. Mukomolova
Federal State­Financed Institution Pediatric Research and Clinical Center for Infectious Diseases under the Federal Medical Biological Agency, Russia, Saint­Petersburg
The article presents the problems of serologic diagnostics of tick­borne borreliosis. There is described the role of serologic investigations in making a diagnosis. There are given the data on basic methods of detection and identification of viruses causing tick­borne borreliosis. The interpretation of received serologic investigations is analysed.
Keywords: tick­borne borreliosis, serologic diagnostics, children, laboratory diagnosis, result interpretation.

Читайте также:  Аденомиоз матки что будет если не лечить

Иксодовый клещевой боррелиоз (ИКБ) или болезнь Лайма – это инфекционное заболевание, вызываемое спирохетами Воrreliа burgdorferi (боррелия Бургдорфери), которое переносят иксодовые клещи. Боррелиоз в отличие от клещевого энцефалита имеет бактериальное происхождение. Боррелии являются грам­отрицательными, подвижными, облигатными внутриклеточными паразитами. Вплоть до конца ХХ столетия клещам, как переносчикам заболевания, не уделялось большого внимания и только после изоляции в Америке возбудителя – B. Burgdorferi было установлено его значение в возникновении данного заболевания. Опасными для человека являются три вида: Borrelia burgdorferi sensu stricto, Borrelia afzelii и Borrelia garinii, но в России только два вида этих грамотрицательных спирохет — Borrelia afzelii и Borrelia garinii распространены на данный момент. ИКБ не передается от человека к человеку. Из всей популяции клещей в 20% это носители боррелий. Возбудитель, вызывающий болезнь Лайма, находится в пищеварительном тракте клеща, поэтому длительность его нахождения на теле человека после присасывания может определять опасность инфицирования и развитие впоследствии заболеваний различной степени тяжести. Ежегодно на территории Российской Федерации констатируется от 7 до 9 тысяч случаев болезни Лайма, которая встречается в основном у детей до 15 лет и у взрослых от 25 до 50 лет. Существуют также данные о выявлении болезни Лайма у младенцев, что объясняется передачей возбудителя трансплацентарно.
Главным отличительным признаком болезни Лайма является эритема, представляющая красное кольцо в месте укуса, которое может быть мигрирующим. У отдельных больных могут существовать и безэритемные формы течения болезни, но, протекающие с лихорадкой и интоксикацией [1, 2, 3].
Обнаружить возбудителя болезни Лайма у обследуемого пациента достаточно сложно. Они присутствуют в пораженных тканях или жидкостях и для их идентификации требуется культивирование на селективной питательной среде Barbour­Stoenner­Kelly (BSK), но эффективность таких исследований составляет всего 50%. Из­за методологических сложностей применение бактериальных методов идентификации возбудителя ограничено, а для этиологической диагностики практически исключено. Применение ПЦР­анализа, которое включает выделение ДНК боррелий в крови пациентов, в качестве этиологической диагностики является малоэффективным и неинформативным, в связи с возможным проникновением возбудителя в органы и ткани, минуя кровяное русло. Чувствительность исследований методом ПЦР на ранних сроках заболевания составляет не более 30%, а при хронизации процесса достигает лишь 10% [4]. Получение частых ложноотрицательных результатов при исследовании цереброспинальной или внутрисуставной жидкости, а также синовиальной ткани, крови и мочи пациентов, связано с тем, что в этих биологических материалах содержание боррелий не более 50 клеток/мл, что ниже порога чувствительности тест­систем. Особое внимание врач­лаборант должен обращать на результаты исследований цереброспинальной жидкости, полученной на поздних стадиях хронического боррелиоза, где количество боррелий минимизировано и составляет от 20 до 25 клеток/мл. [5, 6]. Поэтому ПЦР­диагностику боррелиоза с использованием биологических материалов пациентов скорее можно рекомендовать проводить при весомых клинических подозрениях на инфицирование, а также у пациентов с иммунодефицитными состояниями.
На сегодняшний момент наиболее информативным, простым, и диагностически значимым методом для подтверждения инфицирования боррелиями является иммуноферентный анализ, позволяющий обнаруживать в крови пациента специфические IgM и IgG антитела к возбудителю. Специфические антитела к Borrelia burgdorferi начинают определяться через 2–4 недели от момента начала заболевания. Сначала выявляются иммуноглобулины класса М, а затем, через 1,5–3 месяца после инфицирования, иммуноглобулины класса G. Сложности в диагностике возникают, как правило, при получении отрицательных результатов исследований, проводимых на ранних стадиях заболевания, что может быть связано с поздним антителообразованием или назначением антимикробной терапии сразу после присасывания клеща. Полученный отрицательный результат серологических тестов на ранних сроках после присасывания клеща не является окончательным подтверждением отсутствия инфицирования и требует повторного проведения исследования в динамике через 2–4 недели. При диссеминированных и хронических стадиях заболевания специфические антитела к возбудителю болезни Лайма выявляются практически всегда, то есть в каждом исследовании. Иммуноглобулины класса IgG от нескольких месяцев до нескольких лет циркулируют в крови и обнаруживаются даже после выздоровления, поэтому судить о проведенном лечении только по качественной характеристике наличия антител неправомерно. Иммунитет против Borrelia burgdorferi не является пожизненным и у части людей, перенесших ИКБ, через некоторое время возможно повторное заражение.
При расшифровке полученных лабораторных результатов иммуно­ферментного анализа следует обращать внимание на используемую тест­систему, поскольку анализы могут быть как качественными с интерпретацией «положительно» или «отрицательно», так и количественными, когда результат выражается в виде числовой характеристики концентрации антител. В случае расшифровки проведенного исследования на наличие антител класса IgG к боррелиям следует считать правомочным результат «отрицательно», если концентрация антител составляет менее 10 Ед/мл, от 10 до 15 Ед/мл результат рассматривается как «сомнительно», а свыше 15 Ед/мл — «положительно». При расшифровке результатов исследования антител класса IgM лабораторное заключение «отрицательно» может быть установлено при показателе концентрации антител менее 18 Ед/мл, «сомнительно» – 18–22 Ед/мл, а более 22 Ед/мл – «положительно». Однако, положительный результат при наличии антител класса IgG может указывать не только на болезнь, перенесенную в прошлом, но и наличие заболеваний, вызванных близкородственными спирохетами, например сифилисом или лептоспирозом, а также заболеваниями, обусловленными герпесвирусами (вирусом Эпштейна­Барра, цитомегаловирусом), наличием аутоиммунных, ревматоидных и гематологических заболеваний и других, поэтому для окончательной верификации возбудителя анализ нужно повторить через 1–2 недели. В тоже время полученные отрицательные или сомнительные результаты могут возникать при задержке иммунного ответа, вызванного особенностями, антигенной гетерогенностью возбудителя, наличием у больного иммуносупрессии (ВИЧ­1 инфекция) или при выборе малочувствительной тест­системы для диагностики.
При получении сомнительных результатов после проведения ИФА, в качестве референсного теста используется современный серологический метод –иммуноблотинг в модификациях лайнблот или вестернблот, с помощью которого можно выявлять антитела к высокоспецифичным белкам возбудителя, разделенным по молекулярному весу с помощью электрофореза. Данный способ помогает безошибочно со 100% чувствительностью и 100% специфичностью подтвердить наличие заболевания.
Иммуноблотинг дает возможность определять спектр специфических антител IgM и IgG классов, которые синтезируются у больного к различным антигенам боррелий. При проведении анализа результаты исследования учитываются по степени интенсивности окрашивания полосок­откликов антител на тестовой мембране с нанесенными антигенами, указывающих на наличие или отсутствие антител к тем или иным белкам возбудителя. Учет полосок ведется по каждому антигену с постановкой позитивного и негативного контролей. При обнаружении интенсивно окрашенных откликов антител на мембране результат считается «положительным»; при отсутствии – «отрицательным» и «сомнительным» или «неопределенным» при наличии слабых или неоднозначных откликов, которые не дают возможности достоверно констатировать отсутствие или наличие антител.
Согласно рекомендациям Второй национальной конференции по серологической диагностике болезни Лайма и Center for Diseases Control (CDC) (США) [7], положительным результат определения IgM антител в иммуноблоте следует считать положительным при выявлении двух из трех полос антигенов с молекулярным весом: 25 kDa (OspC), 39 kDa (BmpA) и флагеллин – 41 kDa (Fla). Среди них, пожалуй,
основной – это OspC p25, который при положительной реакции позволяет интерпретировать результат, как «острая» инфекция. Для регистрации положительного результата выявления IgG антител в иммуноблоте требуется определять не менее пяти положительных полос из десяти с антигенамами со следующим молекулярным весом: 18 kDa, 25 kDa (OspC), 28 kDa, 30 kDa, 39 kDa (BmpA), 41 kDa (Fla), 45 kDa, 58 kDa (не GroEL), 66 kDa и 93 kDa. Однако, данные рекомендации не совсем подходят для России, поскольку это обусловлено антигенной гетерогенностью штаммов и видов B. burgdorferi sensu lato. В настоящий момент считается, что некоторые из антигенов боррелий важны для детекции специфических IgG антител: Osp17, р21, p39, p41, p66, p83/100 (p93) из штаммов B. afzelii; p14, p41, p93 из штаммов B. Garinii; OspA, OspC, p93 из штаммов B. burgdorferi sensu stricto. Наиболее часто специфические IgM антитела в иммуноблоте обнаруживают к антигенам p18, OspC, p39, p41 из штаммов B. afzelii; p39, p41, p66, p83 из штаммов B. Garinii; OspC, OspA из штаммов B. burgdorferi sensu stricto. Одной из сложностей интерпретации результатов иммуноблота является то, что спектр антител к различным антигенам может варьировать в зависимости от стадии инфекции [8, 9]. Для подтверждения положительного результата анализ с использованием иммуноблота следует повторить через 3–6 недель. На настоящее время иммуноблот достаточно широко используется для выявления специфических антител в ликворе [10].

Читайте также:  Экстренная контрацепция регулон

Диагностика иксодового клещевого боррелиоза осуществляется на основе комплексной оценки клинических данных и результатов лабораторных исследований. Выбор адекватных диагностических методов зависит от информативности, чувствительности и специфичности применяемых тестов. Своевременная и точная лабораторная диагностика клещевого боррелиоза базируется на использовании комплекса взаимодополняющих методов, основанных на различных подходах к выявлению в биологических средах маркеров возбудителя боррелиоза с учетом особенностей развития и тяжести течения заболевания, а также региональных особенностей B. burgdorferi. Оптимальная схема диагностики поможет определиться с тактикой адекватной терапии для обеспечения, в дальнейшем, благоприятного исхода заболевания.
Список литературы находится в редакции

Ссылка на основную публикацию
Сердце болит долгое время
Боли в области грудной клетки часто связывают с заболеванием сердца, по этой причине количество вызовов скорой помощи зашкаливает. Причин, от...
Семечки арбуза польза и вред
Арбуз кто-то любит, кто-то нет, но едят его много (особенно летом и осенью) и он не является экзотическим фруктом (читайте...
Семидневная диета любимая
Пожалуй, у каждой женщины, которой не безразличен ее вес, есть своя любимая диета. Поговорим о рационе, состоящем из семи однодневных...
Сердце болит и быстро бьется
Бывает, «сердце в груди бьется, как птица» или «как осенний лист дрожит». А иногда «то забьется, то замрет». На языке...
Adblock detector